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脱脂処理 削除/引用 No.4528-4 - 2007/07/17 (火) 17:21:49 - 千 うちのラボでは、特に脱脂処理はしていませんでした。 パラフィン切片だったので、キシレンとエタノールでの処理のうちに多少の脂肪分は抜けてしまうので気にならなかったのかもしれません。 染色されているのは凍結切片でしょうか？ 凍結切片ならば、どうしても必要なら、アセトンで数分処理することで脱脂できると思います。 ポジコンですが、もし連続した切片で常に同一部位が染まっているならばムラではないかもしれません。 あとは、ある程度大きな組織の場合は固定が不十分だったりするとムラになります。 固定後、部分的に赤っぽいようならその部分は未固定です。 ４℃o/nでしっかり固定されるといいと思います。

パーミアビライゼーションがうまくいっていません 削除/引用 No.4528-3 - 2007/07/14 (土) 12:42:47 - 脳でのアポトーシス できればさん，ありがとうございます。脳でのTUNELですが，パーミアビライゼーションがうまくいっていません。ポジティブコントロール（DNase処理後）の染まりにムラがあります。脳の部分によっては細胞が密になっているためかもしれません。脳でのTUNELのパーミアビライゼーションは，他の組織と同じ処理できれいにでますか？脳は脂質が多いためでしょうか？脱脂肪などの処理を行わなくても一様にムラ無くシグナルは検出できるでしょうか？お願いします。

できれば 削除/引用 No.4528-2 - 2007/07/13 (金) 11:52:19 - 千 具体的に、どの段階で苦労されているのでしょうか。 固定がうまくいかないとか、切片がうまく作れないとか、それとも染色の段階ですか？ そのあたりを詳しくご説明いただければ、アドバイスできることもあるかもしれません。 ちなみにうちのラボでは、TUNELはロシェのキットを使っています。 凍結切片でもパラフィンでも、きれいに染まりますよ。

脳でのTUNEL（アポトーシス検出）のコツ 削除/引用 No.4528-1 - 2007/07/10 (火) 02:20:56 - 脳でのアポトーシス 脳を用いてのヒストロジーで，TUNELやカスパーゼなどの細胞核内でのアポトーシスシグナル検出に苦労しています。組織の全処理（固定，脱脂肪，パーミアビライゼーションなど）や組織の厚みなど，どなたかコツなどありましたら教えてください。お願いします。

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