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細胞分化後の細胞数の考え方 トピック削除
No.4524-TOPIC - 2007/07/09 (月) 16:39:56 - KUMA
分化後の細胞数について教えてください。

細胞のデータシートに
●倍加時間:18時間
●飽和密度:50,000cells/cm2

と記載されていました。細胞を起こして1〜2回程継代した後 30,000cells/ml に細胞数を調整し、24wellプレートに2ml/well(つまり、1wellにつき60,000cells)蒔いて分化誘導をかけました。

3T3-L1はだいたい分化誘導後7日目辺りで分化しているようですが、この時の細胞数はどのように計算すればよいのでしょうか。1wellの面積は2cm2なのですが、飽和密度が50,000cells/cm2ということから単純に10,000 cells/cm2と考えるのでしょうか。
倍加時間とありますから、7日間=168時間として168÷18≒9より蒔き始めと比較して細胞数はおよそ9倍になっている(この場合だと90,000 cells/cm2)と考えればよいのでしょうか。
基本的すぎて恐縮なんですが、宜しくお願いします。
 
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数えてみなければ分らないのでは 削除/引用
No.4524-2 - 2007/07/09 (月) 18:21:02 - mom
>1wellの面積は2cm2なのですが、飽和密度が50,000cells/cm2ということから単純に10,000 cells/cm2と考えるのでしょうか。

飽和密度である50,000cells/cm2×2cm2=100,000cells/cm2の書き間違いだと思いますが、おおよその目安としてはそんなところかもしれませんが、KUMAさんの培養条件でコンフルエントの状態が必ずしも50,000cells/cm2であるとは限りません。細胞がwellいっぱいに増えると接触阻止がかかって増えなくなるわけですが、1個1個の細胞の大きさが違えば、同じ面積にいっぱいになる細胞の個数は変わってきます。培養条件によって細胞がうすべったくなり、コンフルエントでも数が少なめだったりすることがあります。


>倍加時間とありますから、7日間=168時間として168÷18≒9より蒔き始めと比較して細胞数はおよそ9倍になっている(この場合だと90,000 cells/cm2)と考えればよいのでしょうか。

18時間で2倍になるわけですから、36時間では2x2倍、計算上は168時間では2の9乗倍…ですが、接触阻止がかかるわけですから、こんなには増えないですね?ちなみに、倍化時間も培地の組成や培養条件によって異なります。

培養の経験が少ないようでしたら、細胞培養に関する本などを参考してまず基礎データをとってみるのが宜しいかと思います。

細胞分化後の細胞数の考え方 削除/引用
No.4524-1 - 2007/07/09 (月) 16:39:56 - KUMA
分化後の細胞数について教えてください。

細胞のデータシートに
●倍加時間:18時間
●飽和密度:50,000cells/cm2

と記載されていました。細胞を起こして1〜2回程継代した後 30,000cells/ml に細胞数を調整し、24wellプレートに2ml/well(つまり、1wellにつき60,000cells)蒔いて分化誘導をかけました。

3T3-L1はだいたい分化誘導後7日目辺りで分化しているようですが、この時の細胞数はどのように計算すればよいのでしょうか。1wellの面積は2cm2なのですが、飽和密度が50,000cells/cm2ということから単純に10,000 cells/cm2と考えるのでしょうか。
倍加時間とありますから、7日間=168時間として168÷18≒9より蒔き始めと比較して細胞数はおよそ9倍になっている(この場合だと90,000 cells/cm2)と考えればよいのでしょうか。
基本的すぎて恐縮なんですが、宜しくお願いします。

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