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タンパク抽出サンプルからの核酸除去
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No.4412-TOPIC - 2007/06/15 (金) 08:00:06 -
ABC
非常に初歩的な質問で申し訳ないのですが、
培養細胞をNP-40やTritonを使用してタンパク抽出を行った場合
(私の条件ではM-PERを使用してタンパク抽出を行いました)、
ATP、CTP、GTP、TTPといった核酸はほぼサンプル内に持ち込んでいると思うのですが、これらの核酸を除去する方法はありますでしょうか?
また、カラムなどをしようする場合、オススメの商品はありますでしょうか?
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No.4412-8 - 2007/06/18 (月) 09:33:39 -
ABC
多くの回答ありがとうございました。
私の書き方が悪かったのですが、gDNAの除去というよりも
ATPやCTPの各単量体が反応測定の邪魔になるため除去したいと考えていました。
サンプルが微量でvolumeをできるだけ増やしたくないのでカラムはどうかなあ、と考えていたのですが、StrataCleanと透析(MicroDialyzer)の併用で一度やってみようと思います。
皆様、ありがとうございました。
(無題)
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No.4412-7 - 2007/06/16 (土) 00:44:11 - A
多少手間ですが硫安沈殿で蛋白を沈殿として回収しては?
(無題)
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No.4412-6 - 2007/06/16 (土) 00:29:05 - page
例えば1 KbpのDNAペアーの分子量は約660 kDaなので透析では若干無理がある
ように思います。
(無題)
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No.4412-5 - 2007/06/15 (金) 17:55:38 - ひろ
核酸に結合するようなタンパクでも透析で核酸除けますか??
(無題)
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No.4412-4 - 2007/06/15 (金) 13:34:35 - R
ただの透析でいいと思いますよ。
(無題)
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No.4412-3 - 2007/06/15 (金) 11:11:32 - page
ちょっと本来の用途とは異なるのですが、、
StrataClean
http://www.stratagene.com/manuals/400714.pdf
本来DNAの精製用として使用されるのですが、このレジンを使えばかなり
簡便にタンパク質のみを得ることができます。サンプルを濃縮するのにも
使えます。ただし、バイオケミカルな実験などには供試することはできないと
思います。非常に効果的です。
(無題)
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No.4412-2 - 2007/06/15 (金) 09:40:35 - 名無し
なんかポリアニオンとかなら行けそうな気がする。ただ一部の蛋白質もくっつけてロスしてしまうかもしまうかもしれないでど。
タンパク抽出サンプルからの核酸除去
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No.4412-1 - 2007/06/15 (金) 08:00:06 -
ABC
非常に初歩的な質問で申し訳ないのですが、
培養細胞をNP-40やTritonを使用してタンパク抽出を行った場合
(私の条件ではM-PERを使用してタンパク抽出を行いました)、
ATP、CTP、GTP、TTPといった核酸はほぼサンプル内に持ち込んでいると思うのですが、これらの核酸を除去する方法はありますでしょうか?
また、カラムなどをしようする場合、オススメの商品はありますでしょうか?
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