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PCRprimerの溶解 トピック削除
No.4364-TOPIC - 2007/06/06 (水) 11:37:14 - PCR
実験の初心者です。
海外で容易に尋ねることができない環境にいます。
PCRprimerを注文して、凍結乾燥の状態で送られてきました。
29.5nmol/0.23mgとしか書いていないのですが10μMストックにするにはどうすればいいでしょうか?
どうかお教えください
 
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(無題) 解決済み 削除/引用
No.4364-4 - 2007/06/10 (日) 12:24:12 - PCR
ありがとうございました。
まさにご指摘のとおりおこないました。くだらない質問におつきあい頂きありがとうございます。

(無題) 削除/引用
No.4364-3 - 2007/06/06 (水) 14:12:19 - gene
>29.5nmol/0.23mg

これは同一のプライマー量を、mol数と重量であらわしているだけです。

10 uM= 10 umol/L=10 nmol/mLということですね。
あとは小学校の算数で習う濃度計算の域を出ないのですが、
29.5 nmolを2.95 mLに溶かすと10 nmol/mL=10 umol/Lになります。

ただし!
普通は、プライマーの安定性のため(濃度が薄いほど分解しやすい)、またボリュームを小さく押さえるため、100 umol/Lのストック溶液とします。
当面使う分量だけ、10倍に希釈しておきます。

また、純水に溶かすと分解しやすい(DNA自体が弱酸であるため)ので、少なくともストックは薄いバッファーに溶かした方がいいです(例えばTE, T10E0.1あるいはEDTA抜きの10 mM Tris buffer)。

(無題) 削除/引用
No.4364-2 - 2007/06/06 (水) 11:51:33 - 年寄
モル濃度 [M]=溶質のモル数 [mol]÷溶液の容量 [L]
μは10の−6乗
nは10の−9乗

PCRprimerの溶解 削除/引用
No.4364-1 - 2007/06/06 (水) 11:37:14 - PCR
実験の初心者です。
海外で容易に尋ねることができない環境にいます。
PCRprimerを注文して、凍結乾燥の状態で送られてきました。
29.5nmol/0.23mgとしか書いていないのですが10μMストックにするにはどうすればいいでしょうか?
どうかお教えください

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