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(無題) 削除/引用 No.4323-6 - 2007/06/01 (金) 19:31:43 - ooshima 間違えました、申し訳ございません

in vitro 核移行アッセイ系 削除/引用 No.4323-5 - 2007/06/01 (金) 19:28:43 - ooshima 培養細胞をコレステロール親和性の高いジギトニンで処理すると、コレステロール含量の高い細胞膜には穴が開くが、低い核膜はインタクトのまま保たれた細胞ができる…と聞きましたが、 実際にどのような実験方法なのでしょうか。プロトコル的なものをご存知の方がいらっしゃいましたら教えてください。

dekimasu. 削除/引用 No.4323-4 - 2007/06/01 (金) 17:14:12 - 名無し もちろん出来る、というか出来ない理由はない。ただ１種類の抗体で普通にウェスタンしてても抗体の質が良くないときは非特異的なシグナルとかがバッとでたりしてどれが何だか分からなくなるときがあるけどもし２種類同時にやってもしかどっちかがよくない抗体でそうなったらさらに訳が分からなくなるかもしれないので一度は別々に普通にやっていいかんじだったら（それか非特異的シグナルがどれかちゃんと分かってから）こんどは２種類同時でやった方がいいと思う。でもこれはバーッとスクリーニングとかするときとかで時間と労力の軽減ということでやるのは別にいいけど決めの実験とかは普通にというかちゃんとやった方がいいと思う。論文とかに載せるデータとかではこういうのは歓迎されないと思う。

(無題) 削除/引用 No.4323-3 - 2007/06/01 (金) 16:32:54 - トロジェンン 通りすがりさん 早速のお答えありがとうございます。 正にそのままのスレットがあったのですね。 失礼しました。 そういうことがないように一応検索はかけているのですが、まだまだ検索のやり方が未熟のようです。 ありがとうございました。

(無題) 削除/引用 No.4323-2 - 2007/06/01 (金) 16:23:22 - 通りすがり 4月にその話題はでてますので参考にしてください。 http://www.kenkyuu.net/cgi-biotech/biotechforum.cgi?mode=view;Code=4104 結果からいえばできます。

2種類の一次抗体で同時にWesternって可能ですか？ 削除/引用 No.4323-1 - 2007/06/01 (金) 16:14:40 - トロジェンン いつも参考にさせて頂いてます。 Westernは初心者なので教えて頂きたいのですが、 2種類の一次抗体で2種類のタンパク質を同時にWesternで検出することは可能なのでしょうか？ 例えば、抗マウス Xタンパク質 抗体（ウサギ)と抗マウス アクチン抗体(ウサギ)の２種類の抗体を同時にメンブレンに反応させて抗ウサギIg抗体で同時に２種類（Ｘタンパク質とアクチン）を検出することが出来るのでしょうか？ タンパク質のサイズが違えば可能なような気がしているのですが、あまりマニュアル本などに載っていないところをみると、やはりなにか不都合があるのでしょうか？ すごくわかりにくい説明かもしれませんが、よろしくお願いします。

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