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心筋細胞vs線維芽細胞 トピック削除
No.4304-TOPIC - 2007/05/30 (水) 10:08:34 - MASH
新生児ラットから,取得した心筋細胞にはいくらか線維芽細胞が含まれていると考えられます.

そこで,どれくらいの率で線維芽細胞が含まれているかを
調べる方法がありましたらご教授いただければと思います.

宜しくお願い致します.
 
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No.4304-7 - 2007/06/20 (水) 12:07:02 - MASH
>Jackie さん,flowは?さん

参考にさせていただきます.
ご教授ありがとうございました.

(無題) 削除/引用
No.4304-6 - 2007/06/16 (土) 14:26:25 - Jackie
cTNTなどの、Sarcomeric Proteinは、細部質に存在するので、Flowするには、細胞を固定して、Detergent処理した後、抗体で染める必要があります。

MASHさんの目的なら、培養している細胞を、ただcTNTとかの心筋のマーカーであるSarcomeric Proteinに対する抗体で染色すればいいと思うのですが。

全細胞(DAPIなどの核染色で検出)- 心筋細胞 = 線維芽細胞を含む非心筋細胞

(無題) 削除/引用
No.4304-5 - 2007/06/16 (土) 09:30:12 - flowは?
心筋細胞特異的とされているcTnTなどでFlow cytometryとかはどうでしょうか?

(無題) 削除/引用
No.4304-4 - 2007/06/15 (金) 11:10:47 - MASH
>MASHさんは、おそらく、心筋細胞の含有率を知りたいのですね

そうなのです.心筋細胞を培養するにあたって
いくらか他の細胞(主として線維芽細胞)が含まれていると思うのですが,
それがどのくらいの割合で含まれているかを検討したいと思っております.

しかし,その方法がなかなか分からない状況であります.
もしご教授していただけれるのでしたら,宜しくお願い致します.

(無題) 削除/引用
No.4304-3 - 2007/06/13 (水) 21:36:14 - Jackie
MASHさんは、おそらく、心筋細胞の含有率を知りたいのですね。線維芽細胞とは、用語的にはかなりブロードで、一般的には、ディッシュに付着しているその他の細胞を指すことがあります。したがって、心筋細胞の含有率を知りたいのでしたら、線維芽細胞を同定するよりも、心筋細胞を同定したほうが目的にかなっているような気がします。

心筋細胞は、Cadiac Toroponin CとかSarcomeric Myosin Heavy chainに対する抗体で同定可能です。

(無題) 削除/引用
No.4304-2 - 2007/06/07 (木) 19:45:33 - kawa
コラーゲンの合成に関わる酵素に対する抗体がfibroblast specific antibodyとして販売されていますが。

http://www.acris-antibodies.com/focus_review/focus0008-Fibroblast.php?region_filter=Worldwide&lg=de

使ったことないので心筋細胞と分離できるかはわかりませんが・・・。

心筋細胞vs線維芽細胞 削除/引用
No.4304-1 - 2007/05/30 (水) 10:08:34 - MASH
新生児ラットから,取得した心筋細胞にはいくらか線維芽細胞が含まれていると考えられます.

そこで,どれくらいの率で線維芽細胞が含まれているかを
調べる方法がありましたらご教授いただければと思います.

宜しくお願い致します.

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