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(無題) 削除/引用 No.4239-5 - 2007/05/20 (日) 06:12:17 - やや経験者 わりと通なボスですね。その通りです。さらに言うと出題者さんの研究では「アポトーシス」なんて特別な細胞死の範疇に収めてしまう必要もなくて、「単に細胞が死んでいる」と論文で書ければ良いだけの情況なのではないですか？私はこの点は深く考えないでよいと思います。 ボスがcaspase比依存的アポトーシスという概念を知っているのならそれを尊重して TUNEL で良いと思います。さらに caspase の像も示して細胞が死んでいっている事は間違いない事を confirm したら良いのでは？

(無題) 削除/引用 No.4239-4 - 2007/05/20 (日) 00:39:46 - ma1230 みなさん有難うございます。 apoptosisも初めてですので、電気泳動など手技が必要になってくるものはなるべくさけたいので、TUNEL法を考えています。caspase3も言われたのですが、ある先生からCaspase非依存性apoptosisもあるのでTUNELの方が良いのではといわれました。その点はどうなのでしょうか？ 　今私が探してみたところProtegaのTUNEL Kitが日本語のmanualもあるし、安いのでいいのかなと思っていますし、業者の人もProtegaはまま売れていますとのことでした。貴重な意見、参考にします。

(無題) 削除/引用 No.4239-3 - 2007/05/18 (金) 13:57:00 - やや経験者 １については活性化caspase3でも良いと思います。実験してみてより綺麗な結果になるほうでよいのではないでしょうか？ ２については原理的には可能です。TUNEL は核を染めますので染まっている核の数を数えればよいです。が、アポトーシスの量を定量的に示すのはあまり意味がないと思うのですがどうでしょうか？TUNEL なり caspase3 なりで組織を染めてみて明確に差があれば普通はそれで問題ないです。

(無題) 削除/引用 No.4239-2 - 2007/05/18 (金) 13:15:57 - K2 組織からDNAを抽出して、ラダー状の電気泳動像が現れるかも見た方が良いのではないでしょうか。 低分子DNAフラグメントの濃さを比較する事で、ラフにですがアポトーシスの程度の比較をする事も出来ると思います。 TUNELは感度は高いのですが、それ単独でapoptosisだと断定するのは少し難しいような気がします。 TUNELのキットとしては、CHEMICONとROCHEから出ているものを試した事がありますが、両方とも問題なく働きました

apoptosisについて 削除/引用 No.4239-1 - 2007/05/18 (金) 07:46:33 - ma1230 私は心臓のapoptosis評価を行おうとしているのですが、まったくapoptisis評価をいままでしたことがないので教えていただきたいことがあります。 �@心臓のapoptosisをwild typeとknockout mouseの組織片で比較したいのですが、TUNEL法で良いでしょうか？ TUNEL法をする上でどの会社のKitが良いでしょうか？ �Aapoptosisの組織内数を比較することというのは可能なのでしょうか？

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