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G0/G1
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No.4237-TOPIC - 2007/05/18 (金) 03:10:25 -
cell cycle入門
細胞がG0ではなくG1周期にあるということを示せる何かよい方法はないでしょうか。
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(無題)
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No.4237-7 - 2007/05/22 (火) 06:30:29 -
おお
あまり詳しくないものです。ちょっとしたお節介ですがおゆるしください。G0/G1の定義っていうのはどうも概念的なところから来ていて議論が絶えないようなきがしています。
そこでアドバイスをするとしたなら、あなたの実験で示したいのがどういう(G0/G1の)状態なのかということだと思います。分化していてG0の状態でG1(セルサイクル)に入れないとか、いろいろあると思います。少しその辺を整理すれば何を見たらいいか考えるといい物が見つかるのではないでしょうか。
具体的でなくてごめんなさい。
>[Re:5] cell+cycle入門さんは書きました :
>flowではG0とG1の区別はできませんよね。
区別はできません。
(無題)
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No.4237-6 - 2007/05/19 (土) 09:16:50 - Boston
G0 の細胞は G1 の細胞に比べて RNA 量が低いですし、代謝も低いです。Pyronin Y で RNA を染色したり、Rhodamine 123 でミトコンドリア活性を FACS で解析するのが一般的だと思うのですが。知識として知っているだけなので、もし解析された方の補足レスがあると助かります。
(無題)
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No.4237-5 - 2007/05/18 (金) 22:43:54 -
cell+cycle入門
皆様ありがとうございます。
たとえば、分化とともに細胞増殖能が低下し(これは実際の細胞数のカウント、Brdu陽性細胞%の低下で示しています)、CyclinD,Eのupregulation、CyclinA,B1のdownregulationを示しているとします。この細胞は増殖停止しているとするとそれはG0にいるのか、G1/SのRでとまっているのかを示したいのですが。flowではG0とG1の区別はできませんよね。
(無題)
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No.4237-4 - 2007/05/18 (金) 15:17:16 - 通りすがり
簡便な方法で、G0と増殖期にある細胞を区別する方法だと、
Ki67で染色するとかでしょうね。
ただ増殖期=G1とは限らないので注意が必要ですが。
また血清飢餓状態に血清を加えたときなどの際には、↓のかたのおっしゃてるようにcyclinDやcyclinEの発現上昇が認められますが、
どのような状態でのG0であるかによって(培養細胞か組織か、血清飢餓で誘導したかcontatc inhibitionでしたのかなどで)適切なマーカーは違うでしょうし、細胞の種類によっても違いますからね。
その意味ではこの部分は万人を納得させられる方法はないのですよ、実際は。
一種類で示してもたいていG0関連のは疑われることが多いので
複数の方法で示して詰めてくしかないでしょうね。
(無題)
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No.4237-3 - 2007/05/18 (金) 05:34:54 - やぶ
連続投稿ですが思いつきましたので・・・
G1からSに移行するときって CyclinE、CyclinD などが必要ですよね?細胞周期の進行サイクルに乗っている G1 の細胞ならこれらの活性が必要でしょうし、G0 の細胞ではこれらの活性(タンパク発現?)は必要ないのでは無いでしょうか?コンセンサスを得ているアイデアなのかどうか分かりませんが、可能性として書いてみました。
(無題)
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No.4237-2 - 2007/05/18 (金) 05:29:16 - やぶ
柳田充弘先生がこういうお仕事をされているのではないでしょうか?論文をあさってみてはどうですか?(柳田研のお若いさんだったりして?笑)
G0/G1
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No.4237-1 - 2007/05/18 (金) 03:10:25 -
cell cycle入門
細胞がG0ではなくG1周期にあるということを示せる何かよい方法はないでしょうか。
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