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IPサンプルのclearance トピック削除
No.4227-TOPIC - 2007/05/16 (水) 13:59:14 - Ino
核蛋白のIPサンプル調整で、核エクストラクトを遠心して沈殿物を取り除きます。皆様このときの遠心ってどのくらいかけてますか?私はラボの古い遠心機でフルスピード(でも18000xgくらい、悲)にて1分だったのですが、ふと文献をみるともっと高いGで10分とか30分とかやっているようです。もっともターゲットによりけりとは思いますが、同様の実験をされている方の意見を伺えますでしょうか?
 
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(無題) 削除/引用
No.4227-2 - 2007/05/17 (木) 10:49:26 - 通りすがり
おっしゃるとおりターゲットによりけりですよ。

抽出されにくいクロマチンの因子で複合体の精製とかやるときは
一回遠心してエクストラクトとった後
もう一回同じ量のbuffer入れてまた遠心とかしますが、

ほとんどの転写因子でただのIPとかが目的なら
1分でinputで確認できてたら全然実験に支障はないです。

あと18,000gでなくても8,000gぐらいでも
かなりの核タンパクは抽出できますよ。

IPサンプルのclearance 削除/引用
No.4227-1 - 2007/05/16 (水) 13:59:14 - Ino
核蛋白のIPサンプル調整で、核エクストラクトを遠心して沈殿物を取り除きます。皆様このときの遠心ってどのくらいかけてますか?私はラボの古い遠心機でフルスピード(でも18000xgくらい、悲)にて1分だったのですが、ふと文献をみるともっと高いGで10分とか30分とかやっているようです。もっともターゲットによりけりとは思いますが、同様の実験をされている方の意見を伺えますでしょうか?

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