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(無題) 削除/引用 No.4222-3 - 2007/05/16 (水) 20:14:51 - はつげん コメントありがとうございます。 RNAlaterでperfusionとはすごいですね。 でもそもそも所要時間3-5分くらいの組織サンプリングの場合にそこまでRNA分解のことを気にしてあれこれする必要があるのかということです(もちろん30分とか１時間以上もかかるのであれば別ですが)。 すぐに-80℃なりRNAlaterに入れるなりすればいいように思うのですが・・・ マウス安楽死からの時間経過(分スケール)によって、遺伝子発現に影響がでたという経験をお持ちの方はいらっしゃいますでしょうか？

RNAlater 削除/引用 No.4222-2 - 2007/05/16 (水) 04:43:33 - 金なし研究者 PBS/heparinでのperfusion後、AmbionのRNAlaterでのperfusionをしていた友人がおります。もちろんお金持ちな方です。

RNA分解までの時間 削除/引用 No.4222-1 - 2007/05/16 (水) 00:51:20 - ぶんかい マウスの脳組織の部位分けをして、RNA抽出、定量PCRといった流れで実験をしようとしています。 マウス断頭から部位分けをして、RNAlaterや-80℃で凍結させるまで、3-5分 かかります。 そして、その間のRNAの分解を気にして、aCSFを使ったらどうかなどラボ内で意見がでています。 5分くらいであれば、部位分け後すぐに凍結等すれば問題ない (早くするにこしたことはないが、しょうがない) ように思うのですが、みなさまはどのようにされていますか？ 組織摘出までにどのくらいかかるようだったら、RNA分解が問題になってくるといった一般的な時間などあるのでしょうか？ または、なにか適切な処理があるのでしょうか？

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