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Realtime PCRのための安価なRNA抽出方法 トピック削除
No.4193-TOPIC - 2007/05/10 (木) 21:06:12 - 抽出
現在Realtime PCRで遺伝子の発現量を定量することを行っています。
テンプレートはQuiagenのRNeasy Plant Mini Kitでtotal RNAをとり、ABIのHigh Capacity cDNA Archive Kitで得たcDNAを利用しています。

Realtime PCRを行う際はRNAの質が重要になると思われますが、キット以外で抽出したRNAからでも定量は可能でしょうか? RNAの簡便な抽出法としてはGTC法やSDSとフェノールを用いた方法などがあるようですが、それらの方法では不十分でしょうか?
もし無理であればRealtime PCRによる定量に使えてかつ安価なキットがあれば紹介していただきたいです。
よろしくお願いします。
 
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(無題) 削除/引用
No.4193-2 - 2007/05/12 (土) 21:27:00 - そば
理論上、キット以外で抽出したRNAでも定量PCRは可能だと思いますが、
>Realtime PCRを行う際はRNAの質が重要になると思われますが
そう思うのであれば、市販のキットに頼った方が無難だと思います。

植物細胞を扱っているのであれば、特別に気を付けなければいけないことがあるかもしれませんし(多糖類が多いんでしたっけ?)


定価ベースで比較的安価なRNA抽出キットだと
カラム系なら日本ジェネティクスで扱っているNucleoSpin
溶媒系ならTRIsureあたりでしょうか。

ただ、価格は納入する業者によっても変わりますし、キャンペーン等でも変わりますから、価格に関しては業者に相談する方が確かな情報になると思いますよ。

Realtime PCRのための安価なRNA抽出方法 削除/引用
No.4193-1 - 2007/05/10 (木) 21:06:12 - 抽出
現在Realtime PCRで遺伝子の発現量を定量することを行っています。
テンプレートはQuiagenのRNeasy Plant Mini Kitでtotal RNAをとり、ABIのHigh Capacity cDNA Archive Kitで得たcDNAを利用しています。

Realtime PCRを行う際はRNAの質が重要になると思われますが、キット以外で抽出したRNAからでも定量は可能でしょうか? RNAの簡便な抽出法としてはGTC法やSDSとフェノールを用いた方法などがあるようですが、それらの方法では不十分でしょうか?
もし無理であればRealtime PCRによる定量に使えてかつ安価なキットがあれば紹介していただきたいです。
よろしくお願いします。

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