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(無題) 削除/引用 No.4170-3 - 2007/05/08 (火) 17:15:41 - 奴隷 免疫沈降を行った後にウエスタンをしている実験では、チロシンリン酸化の検出に抗リン酸化チロシン抗体（基質のえり好みが少なくリン酸化チロシンなら広く検出できる）を使っていて、免疫沈降なしでウエスタンをしている実験では、セリンリン酸化の検出に抗リン酸化「そのタンパク質」抗体を使っているのではありませんか？ 前者は、免疫沈降なしでウエスタンすると、チロシンリン酸化された多数のタンパク質が検出されて、そのタンパク質のリン酸化かどうか区別することができません。それに対し、後者はそのタンパク質のリン酸化であることが確認できます（それも、本当は場合によりけりですが）。

(無題) 削除/引用 No.4170-2 - 2007/05/08 (火) 16:54:07 - 〜 IPとWBの抗体は同じでしょうか、別のものでしょうか。 同じ場合： たんぱく質濃度が薄くて、lysateをそのまま流しでも検出できない場合に、 濃縮するためにIPする場合があります。 別の場合： IPの抗体に結合するたんぱく質で、WBの抗体でも反応するものを検出できます。 ex)調べたいたんぱく質をIPで回収し、 　 その中でセリンがリン酸化しているたんぱく質をWBで検出する (IPせずに、リン酸化セリンを検出する抗体でWBした場合、セリンがリン酸化しているたんぱく質が山ほど検出されるかもしれません)

免疫沈降について 削除/引用 No.4170-1 - 2007/05/08 (火) 13:42:48 - you 実験データとして免疫沈降を行った後、ウエスタンブロットをする結果と、免疫沈降を行わずにウエスタンを行っている結果があるのですが、この比較の意味が理解できません。 ちなみに、前者はチロシンのリン酸化を、後者はセリンのリン酸化を見る実験なのですが。 そもそも免疫沈降を行う意味が理解できていないのかも知れませんが...

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