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Huh-7細胞について トピック削除
No.4161-TOPIC - 2007/05/06 (日) 12:23:29 - you
Huh-7細胞を用いたTNF-αによる活性酸素上昇の論文を読んだのですが、なぜHuh-7細胞を用いて実験を行うのかわかりません。実験はミトコンドリアの活性酸素レベルが上昇すればインスリン抵抗性が生じるといった内容なんですが。どなたかHuh-7細胞の特性を教えていただけませんか?
 
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(無題) 解決済み 削除/引用
No.4161-4 - 2007/05/07 (月) 22:19:16 - you
わかりやすい説明ありがとうございます!

Huh-7細胞について 削除/引用
No.4161-3 - 2007/05/07 (月) 17:45:01 - hiro
In vitroのインスリン抵抗性関連実験を行う際に重要なのはインスリンシグナル関連分子であるインスリンレセプター、IRS(肝細胞であれば主にIRS-2)、PI3 kinase、Akt等の発現があってなおかつインスリンによるこれらの分子のリン酸化のシグナル伝達が起こることが明らかになっているcell lineを用いる必要があるという点です。Huh-7はインスリン刺激時にこのシグナル伝達が起こることがすでに報告されており、この種の実験にて頻用されています。ただし、Huh-7には糖新生およびmediumへの糖放出能がないという欠点があり、インスリンシグナル伝達までは見ることができますがその後の肝糖放出を評価することができません。このため当ラボでは培養液中への糖放出能を有するH4IIEC細胞をこの種の実験に用いております。(もっともいいのはprimary culture hepatocyteを用いることですが…)
ちなみに、肝細胞における細胞内グルコース取り込みにインスリン依存性はありません。hepatocyteには主にGlucose transporter 2が発現しており、インスリンと無関係に培養液中の濃度に応じてグルコースは細胞内に取り込まれます。

(無題) 削除/引用
No.4161-2 - 2007/05/07 (月) 04:13:19 - YT
You better check it out on literature or websites of ATCC.

I am not very familliar with HuH-7 cells. But, I guess, in your experiment you have to use cell lines whose glucose uptake is enhanced by insulin (so-called "Insulin-dependent glucose uptake"). The liver is one of organs which shows insulin-dependent glucose uptake and, in addition, in response to insulin stimulation it stops glyconeogenesis and uptake glucose more efficiently, I believe. That is why, liver cells seem to be good candidates for investigation of insulin and glucose metabolism.

By the way, you better not reveal detail of your projects here. Or, you might be scooped by someone who are doing similar works.

Huh-7細胞について 削除/引用
No.4161-1 - 2007/05/06 (日) 12:23:29 - you
Huh-7細胞を用いたTNF-αによる活性酸素上昇の論文を読んだのですが、なぜHuh-7細胞を用いて実験を行うのかわかりません。実験はミトコンドリアの活性酸素レベルが上昇すればインスリン抵抗性が生じるといった内容なんですが。どなたかHuh-7細胞の特性を教えていただけませんか?

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