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(無題) 削除/引用 No.4156-5 - 2007/05/07 (月) 11:36:37 - D ご返信ありがとうございます 293Tは以前に感染させて次の日には100%の効率で光っているのが確認できましたが、Tが入っていない293が今のラボには無いような… HeLaはその後もう一度1.5倍のウイルスを感染させたところ 100%の効率で感染し、すぐに光っていました 最初に感染させた時も十分すぎるぐらいのウイルスを感染させているはずなので、何故感染しなかったのか分りませんが 時期、濃度をもう一度検討してみようと思います ありがとうございました

(無題) 削除/引用 No.4156-4 - 2007/05/06 (日) 21:26:10 - ひろ 293Tはレンチ感染しやすいです。 HeLaはなぜかわかりませんが感染しにくいです。 あと293Tの場合は細胞数など関係なく導入しやすいのですが、HeLaの場合50%conflentで細胞を感染させた方が感染しやすいです。 過去の経験上80〜100%だとほとんど感染しません。 理由はわかりません。 逆転写産物がほとんどでないので感染前期に影響があると思います。

(無題) 削除/引用 No.4156-3 - 2007/05/06 (日) 16:48:03 - D ご返信ありがとうございます ダブリングタイムはHeLaより遅いのに次の日には見えていましたか どうして遅い細胞がいるのかは不明ですが HEK293などのほかの発現の早いヒト細胞でやった方が良さそうですね

(無題) 削除/引用 No.4156-2 - 2007/05/05 (土) 13:07:18 - 〜 Saos2だと翌朝には見えてました。 ダブリングタイムはHeLaよりも遅いと思います。

ウイルス感染後の遺伝子発現までの時間 削除/引用 No.4156-1 - 2007/05/04 (金) 21:56:08 - D HeLaにレンチウイルスで遺伝子導入を行うとどのぐらいで発現が確認できるものなのでしょうか？ EF1alpha promoter EGFPを導入しています ウイルスタイターはかなり高いです 普段マウスの細胞や293だと次の日には光が確認でき 3日目ぐらいでもうMAXに近いぐらい光っているのですが Helaに感染させて48時間以上経過してもかすかな光すらまだ見えていません 以前増殖の遅いヒトの細胞に感染させた時には1週間ぐらいから光り始めて3週間ぐらいでMAXに達したことがあったので HeLaでもそのぐらいかかってしまうものなんでしょうか？ レトロでは○日、CMVなら○日でOKなど 何か情報がありましたら宜しくお願いいたします

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